Byly podrobně vyhodnoceny výsledky ze vzorkovací sezóny 2011 získané na obou pracovištích, a závěry byly prodiskutovány. Na tomto základě byly připraveny pracovní a vzorkovací plány pro koupací sezónu 2012. Byly doplněny další profily (koupaliště VN Hostivař – průběžné napouštění bylo kontrolováno pochůzkou, VN Džbán – odběr byl prováděn z hráze, odtok z ČOV Písek (znečišťuje profil Vojníkov) a Otava nad odtokem z ČOV Písek (kontrolní profil). Profil Vojníkov limnigraf nebyl dále odebírán. Vzorkování začalo 14.5.2012 a pokračovalo v 14 denních intervalech až do 3.9.2012. Do plánu vzorkování bylo zahrnuto i víkendové vzorkování ve vrcholné sezóně a při dvou odběrech. Celkem bylo provedeno v koupací sezóně 10 odběrů, ve dvou odběrech byly odebírány i sedimenty.
Byly upřesněny soubory stanovovaných ukazatelů (doplněno stanovení enterokoků na médiu od firmy Trios, další typ Enterolertu, úprava metod záchytu salmonel a listerií tampóny). Byla zkonzultována a upravena metoda stanovení Staphylococcus aureus (ve VÚV Ostrava), byly prokonzultovány další metody molekulární identifikace Campylobacter a Staphylococcus aureus pomocí PCR (na VŠCHT). Z vybraných kmenů byla izolována DNA tepelnou lýzou, v příštím roce bude ověřeno PCR.
Pomocí kmenů z České sbírky mikroorganismů s definovaným obsahem byla ověřena záchytnost nových médií na stanovení E. coli (CCM, Rapid 2 E. coli agar, tergitolové médium) a enterokoků (SB různých firem).
Byla testována nová metoda na stanovení Clostridium perfringens (které bylo stanovováno v sedimentech), která by měla v normě nahradit stávající metodu na mCP agaru. Zúčastnili jsme se i mezinárodního mezilaboratorního porovnávání.
Dne 26.4.2012 se konal seminář „Metody analýz koupacích vod v České republice“, na nějž byli pozváni pracovníci hydroanalytických laboratoří, které dodávají výsledky do IS PiVo. Zúčastnilo se jej téměř 40 lidí. Součástí semináře byly prezentace výsledků řešení tohoto úkolu v loňském roce, současné problémy a výhled do letošní koupací sezóny a praktické ukázky nových médií (CCM, mikrotitrační destičky, Rapid 2 E. coli agar), včetně počítání výsledků jednotlivými účastníky. Výsledky byly vyhodnoceny. Nejpozitivnější ohlas zaznamenal Rapid 2 E. coli agar. Prezentace jsou přiloženy.
Na konferenci Mikrobiológia vody a prostredia 2012 (září 2012, Slovensko) byly prezentovány 4 příspěvky (Nové metody stanovení indikátorů fekálního znečištění v koupacích vodách, Výskyt bakterií rodu Campylobacter v koupacích vodách, Problematika koupání vers. vodní sporty v českých tocích, a Výskyt a význam Pseudomonas aeruginosa v koupacích vodách), výsledky stanovení bakterií v sedimentech byly prezentovány na konferenci Analytika odpadů II ve Žďáru nad Sázavou.
Bylo zorganizováno MPZ, týkající se nových metod stanovení indikátorů fekálního znečištění v koupacích vodách (chromogenní média, mikrotitrační destičky, Enterolert E a DW. Celkem se zúčastnilo 10 laboratoří. Účastníkům byly předány podrobné pokyny, jak nové metody provádět a veškerý potřebný laboratorní materiál. Zpráva o výsledcích MPZ je přiložena.
Dne 10.5. 2012 se konal seminář „Vzorkování přírodních koupališť“ (co všechno by vzorkař mohl/měl znát), kterého se zúčastnilo 37 lidí, a který byl zaměřen na změny, týkající se vzorkování přírodních koupališť přicházející s novou legislativou, obecné znalosti (o mikrobiologii a hydrobiologii), které by vzorkaři měli mít (ale obvykle nemají), a znalosti k dobrému posouzení situace v místě odběru (rozpoznání vodních květů sinic a dalších pouhým okem pozorovatelných organismů).
Na konferenci Vodárenská biologie byly prezentovány 2 příspěvky (věnované nové legislativě pro přírodní koupací vody a odběrům přírodních koupacích vod) a jeden poster (věnovaný stanovení chlorofylu-a).
Po celou sezónu byly odebírány a stanovovány parazitičtí prvoci Giardia spp. a Cryptosporidium spp. Metoda pracovala s dobrou výtěžností, což bylo potvrzeno i účastí v mezinárodních MPZ. Nejvyšší nálezy byly v řekách (Otava - Vojníkov, Berounka - Černošice). Korelace mezi indikátory a prvoky byla v profilu Černošice velmi těsná.
Byly zkoumány některé aspekty metodiky pro stanovení sinic (různé způsoby dezintegrace kolonií s důrazem na využití ultrazvukového homogenizátoru a obtížně dezintegrovatelné taxony - především Microcystis viridis). Dále byly prováděny pokusy se zahuštěním v terénu pomocí sít.
V rámci standardních MPZ pro stanovení sinic byla laboratořím, které mají přístroje k měření kvantity sinic pomocí fluorescence (in situ sondy, laboratorní fluorometry), nabídnuta možnost srovnat si metodu na 4 vzorcích. Využila toho však pouze jedna laboratoř, takže možnost srovnání byla omezená.
Na mezinárodní konferenci Pitná voda 2012 (Tábor, květen 2012) byl jako vyžádaná přednáška prezentován příspěvek „Metoda QMRA a její využití při hodnocení kvality povrchových i upravených vod“, který teoreticky popisuje metodu kvantitativního hodnocení mikrobiologického rizika (QMRA) a uvádí řadu příkladů jeho praktické aplikace.
Výsledky sledování výskytu referenčních patogenů (prvoci Cryptosporidium spp. a Giardia spp. a bakterie Campylobacter spp. (termotolerantní) a Salmonella spp.) na pěti vybraných profilech povrchových vod využívaných ke koupání byly zpracovány metodou QMRA (kvantitativní hodnocení mikrobiologického rizika) a bylo vypočteno zdravotní riziko pro koupající se osoby, které se na jednotlivých lokalitách pohybuje v řádu 1/10 (onemocní jedna osoba z deseti exponovaných) až 2/100.
Byla zpracována odborná zpráva hodnocení zdravotního rizika z vodního lyžování a to jak teoreticky, tak na vybrané lokalitě (nádrž Horka u Stráže pod Ralskem).
Vybrané metody byly prováděny paralelně ve VÚV TGM, v.v.i.a SZÚ a výsledky byly zhodnoceny. Nejednalo se o dělené vzorky, nýbrž o vzorky paralelně odebírané (v jeden čas na jedné lokalitě).
V případě E. coli, obě laboratoře prováděli detekci metodou Colilert, na chromogenním médiu CCM (kultivace při 36°C, bez přídavku antibiotik) a na Rapid E. coli agaru.
Colilert | CCM | Rapid 2 E. coli agar | |
Rapid 2 E. coli agar | 60 | 40 | 36 |
Celkový průměr výsledků VÚV/SZÚ | 280/236 | 309/220 | 345/188 |
Korelační koeficient R2 | 0,9385 | 0,934 | 0,2424 |
Regresní přímka | Y=0,7612x | Y=0,6565x | Y=0,320x |
Průměr RSD | 23,5% | 40,6% | 41,,8% |
Absolutně nejlepší výsledky byly získány metodou Colilert, která je pro analýzy koupacích vod velmi vhodná. U chromogenních médií mohly být rozdíly způsobeny jednat subjektivním pohledem na barvy kolonií a především díky vysokému podílu doprovodné mikroflóry, která rušila stanovení a muselo se odečítat kolonie z vyššího ředění (nižší absolutní počet odečtených kolonií). Lepší výsledky byly překvapivě získány na CCM agaru oproti Rapid2 E. coli agaru (odlišný výsledek ve srovnání s MPZ).
V případě intestinálních enterokoků, obě laboratoře prováděli detekci na SB od firem Merck, Himedia a Trios a Enterolerty E a DW.
SB Merck | SB Himedia | SB Trios | Enterolert E | Enterolert DW | |
Počet paralelních analýz | 60 | 23 | 28 | 56 | 56 |
Celkový průměr výsledků VÚV/ SZÚ | 131/62 | 302/139 | 112/97 | 81/76 | 108/102 |
Korelační koeficient R2 | 0,5979 | 0,657 | 0,9275 | 0,7953 | 0,4091 |
Regresní přímka | Y=0,3602x | Y=0,3577x | Y=0,8092x | Y=1,0268x | Y=0,7907x |
Průměr RSD | 38,3% | 45,6% | 30,9% | 40,3% | 39% |
Absolutně nejlepší výsledky byly získány standardní metodou dle ČSN EN ISO 7899-2 a to na médiu SB od firmy Trios, které zároveň vykazovalo nejmenší podíl presumptivních enterokoků. Překvapivě dobré výsledky byly dosaženy i metodou Enterolert E, a to i přes určité nejasnosti při hodnocení někdy se vyskytujících slabě fluoreskujících jamek u stojatých vod.
Datum poslední aktualizace stránky: 17.8.2016